potatoКартофелеводствоPotato Growing0134-9740Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводствуpotato-135Research ArticleГЕНЕТИКА КАРТОФЕЛЯPOTATO GENETICSОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ КАНАМИЦИНА В СЕЛЕКТИВНОЙ СРЕДЕ ДЛЯ ОТБОРА ТРАНСГЕННЫХ ФОРМ КАРТОФЕЛЯ С ЭКСПРЕССИЕЙ РЕПОРТЕРНОГО ГЕНА NPT IIDETERMINATION OF THE EFFECTIVE CONCENTRATION OF CANAMICINE IN SELECTIVE MEDIUM FOR THE SELECTION OF TRANSGENIC POTATOES WITH THE NPT II REPORTER GENEРодькинаИ. А.RodkinaI. A.

аг. Самохваловичи, Минский район

rodkina@tut.byЯхонтЮ. В.YahontYu. V.

аг. Самохваловичи, Минский район

КондратюкА. В.KondratyukA. V.

аг. Самохваловичи, Минский район

ЯковлеваГ. А.YakovlevaG. A.

г. Минск

РУП «Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству»BelarusУО «Белорусский государственный медицинский университет»Belarus2017200420222516881Copyright © Родькина И.А., Яхонт Ю.В., Кондратюк А.В., Яковлева Г.А., 20222022Родькина И.А., Яхонт Ю.В., Кондратюк А.В., Яковлева Г.А.Rodkina I.A., Yahont Y.V., Kondratyuk A.V., Yakovleva G.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://potato.belal.by/jour/article/view/135

В статье приведены результаты исследований по оценке гибридного материала от 4-х комбинаций анализирующих скрещиваний трансгенных образцов с репортерным геном npt II по фенотипическому проявлению маркерного признака – устойчивость к антибиотику канамицин при культивировании на селективной среде. По данным ДНК-маркирования, в гибридном материале были отобраны трансгенные (+npt II) и нетрансгенные формы (–npt II), которые культивировали на селективных средах с различной концентрацией канамицин сульфата (100, 220, 250, 300, 350, 400 мг/л). Установлено, что для первичного скрининга генеративного потомства от трансгенных образцов на наличие маркерного признака следует использовать селективную среду с концентрацией канамицина сульфата 220–250 мг/л. Доказано, что образование воздушных корней у растений in vitro при культивировании на селективной среде с канамицином не связано с экспрессией маркерного гена npt II.

The research result on the evaluation of a hybrid material of 4 combinations of analyzing crosses of transgenic potatoes with npt II gene on the phenotypic appearance of a marker sign – the resistance to the antibiotic kanamycin when cultured on selective medium are presented in the article. According to the DNA marking data, transgenic (+npt II) and non-transgenic forms (–npt II) were selected and cultured on selective media with different concentration of kanamycin sulfate (100, 220, 250, 300, 350, 400 mg/l). It was established that selective medium with a concentration of kanamycin sulfate of 220–250 mg/l should be used for the screening of generative progeny from transgenic samples with npt II gene. It was proved that the formation of air roots of in vitro potatoes plants is not associated with the expression of the marker gene npt II.

картофельтрансгенные растениягенеративное потомствомаркерный ген npt IIканамицин-устойчивостьПЦР-анализpotatoestransgenic plantsgenerative progenymarker gene of npt IIkanamycin resistancePCR-analysisReferencesYoder, J. I. Transformation system for generation marker-free transgenic plants / J. I. Yoder, A. P. Goldsbrough // Biotechnology. – 1994. – Vol. 12. – P. 263–267.Yoder, J. I. Transformation system for generation marker-free transgenic plants / J. I. Yoder, A. P. Goldsbrough // Biotechnology. – 1994. – Vol. 12. – P. 263–267.Miki, B. Selectable marker genes in transgenic plants: applications, alternatives and biosafety / B. Miki, S. McHugh // Journal of Biotechnology. – 2004. – Vol. 107 (3). – P. 193–232.Miki, B. Selectable marker genes in transgenic plants: applications, alternatives and biosafety / B. Miki, S. McHugh // Journal of Biotechnology. – 2004. – Vol. 107 (3). – P. 193–232.Antibiotic Resistance Markers in Genetically Modified (GM) Crops // Biotechnology EFo. – 2001. – Р. 1–4.Antibiotic Resistance Markers in Genetically Modified (GM) Crops // Biotechnology EFo. – 2001. – Р. 1–4.Наследование и экспрессия трансгена npt II in vivo и in vitro у кукурузы / Е. В. Шапар [и др.] // Современная физиология растений: от молекул до экосистем: материалы Междунар. конф., Сыктывкар, 18–24 июня 2007 г.: в 3-х ч. – Сыктывкар, 2007. – Ч. 3. – 412 с.Наследование и экспрессия трансгена npt II in vivo и in vitro у кукурузы / Е. В. Шапар [и др.] // Современная физиология растений: от молекул до экосистем: материалы Междунар. конф., Сыктывкар, 18–24 июня 2007 г.: в 3-х ч. – Сыктывкар, 2007. – Ч. 3. – 412 с.Методические указания по первичному отбору гибридных сеянцев от трансгенных растений картофеля по маркерному признаку / И. А. Родькина [и др.]; Нац. акад. наук Беларуси, Науч.-практ. центр Нац. акад. наук Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству. – Минск: ГИВЦ Минсельхозпрода, 2009. – 20 с.Методические указания по первичному отбору гибридных сеянцев от трансгенных растений картофеля по маркерному признаку / И. А. Родькина [и др.]; Нац. акад. наук Беларуси, Науч.-практ. центр Нац. акад. наук Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству. – Минск: ГИВЦ Минсельхозпрода, 2009. – 20 с.Методические указания по получению трансформированных растений картофеля / Рос. акад. с.-х. наук, ВНИИКХ. – М., 1995. – 15 с.Методические указания по получению трансформированных растений картофеля / Рос. акад. с.-х. наук, ВНИИКХ. – М., 1995. – 15 с.Исаенко, Е. В. Анализ наследования трансгена сry3aM у потомства модифицированных растений картофеля / Е. В. Исаенко, Н. А. Картель // Генетика и биотехнология XXI века. Фундаментальные и прикладные аспекты: материалы Междунар. науч. конф., Минск, 3–6 дек. 2008 г. / Ин-т генетики и цитологии НАН Беларуси. – Минск, 2008. – C. 82–85.Исаенко, Е. В. Анализ наследования трансгена сry3aM у потомства модифицированных растений картофеля / Е. В. Исаенко, Н. А. Картель // Генетика и биотехнология XXI века. Фундаментальные и прикладные аспекты: материалы Междунар. науч. конф., Минск, 3–6 дек. 2008 г. / Ин-т генетики и цитологии НАН Беларуси. – Минск, 2008. – C. 82–85.Богомаз, Д. И. Изучение взаимодействия генотипов растений и штамма Agrobacterium tumifacients при получении форм картофеля, устойчивых к колорадскому жуку / Д. И. Богомаз // Экологическая генетика. – 2005. – Т. III. – № 1. – С. 34–41.Богомаз, Д. И. Изучение взаимодействия генотипов растений и штамма Agrobacterium tumifacients при получении форм картофеля, устойчивых к колорадскому жуку / Д. И. Богомаз // Экологическая генетика. – 2005. – Т. III. – № 1. – С. 34–41.Левенко, Б. А. Трансгенные растения. Современное состояние, проблемы, перспективы / Б. А. Левенко. – Киев: Дошкольник, 2000. – 305 с.Левенко, Б. А. Трансгенные растения. Современное состояние, проблемы, перспективы / Б. А. Левенко. – Киев: Дошкольник, 2000. – 305 с.Инактивирование чужеродных генов в геноме трансгенных растений / Е. В. Дейнеко [и др.] // Изучение генома и генетическая трансформация растений: материалы Всерос. симпозиума, Иркутск, 23–27 авг. 1999 г. – Новосибирск: Наука, 2001. – С. 132–142.Инактивирование чужеродных генов в геноме трансгенных растений / Е. В. Дейнеко [и др.] // Изучение генома и генетическая трансформация растений: материалы Всерос. симпозиума, Иркутск, 23–27 авг. 1999 г. – Новосибирск: Наука, 2001. – С. 132–142.Курочкина, С. Д. Получение трансгенных растений картофеля и их молекулярно-генетический анализ: автореф. дис… канд. биол. наук: 03.00.15 / С. Д. Курочкина; ИГиЦ НАН Беларуси. – Минск, 1995. – 20 с.Курочкина, С. Д. Получение трансгенных растений картофеля и их молекулярно-генетический анализ: автореф. дис… канд. биол. наук: 03.00.15 / С. Д. Курочкина; ИГиЦ НАН Беларуси. – Минск, 1995. – 20 с.Получение новых форм картофеля методами биотехнологии / Г. А. Яковлева [и др.] // Аграр. наука на рубеже XXI в.: материалы общ. собр. ААН Респ. Беларусь, Минск, 16 нояб. 2000 г. / Минсельхозпрод, ААН Респ. Беларусь. – Минск, 2000. – С. 214–218.Получение новых форм картофеля методами биотехнологии / Г. А. Яковлева [и др.] // Аграр. наука на рубеже XXI в.: материалы общ. собр. ААН Респ. Беларусь, Минск, 16 нояб. 2000 г. / Минсельхозпрод, ААН Респ. Беларусь. – Минск, 2000. – С. 214–218.Родькина, И. А. Наследование маркерного признака устойчивости к канамицину в половом потомстве трансгенных растений / И. А. Родькина, Г. А. Яковлева // Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии: материалы II Междунар. науч. конф., Москва, 18–19 окт. 2000 г. / РАСХН, ВНИИ с.-х. биотехнологии. – М., 2000. – С. 126–128.Родькина, И. А. Наследование маркерного признака устойчивости к канамицину в половом потомстве трансгенных растений / И. А. Родькина, Г. А. Яковлева // Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии: материалы II Междунар. науч. конф., Москва, 18–19 окт. 2000 г. / РАСХН, ВНИИ с.-х. биотехнологии. – М., 2000. – С. 126–128.Родькина, И. А. Устойчивость к канамицину полового потомства трансгенных растений картофеля с разными целевыми генами / И. А. Родькина, Г. А. Яковлева // С.-х. биотехнология: материалы II Междунар. науч.-практ. конф., Горки, 3–6 дек. 2001 г. / Минсельхозпрод, НАН Беларуси, БГСХА. – Горки, 2002. – С. 274–277.Родькина, И. А. Устойчивость к канамицину полового потомства трансгенных растений картофеля с разными целевыми генами / И. А. Родькина, Г. А. Яковлева // С.-х. биотехнология: материалы II Междунар. науч.-практ. конф., Горки, 3–6 дек. 2001 г. / Минсельхозпрод, НАН Беларуси, БГСХА. – Горки, 2002. – С. 274–277.Яковлева, Г. А. Полевые и лабораторные испытания трансгенного картофеля с частично-модифицированным геном бациллярного токсина / Г. А. Яковлева, И. В. Гулина, И. А. Родькина // Молекуляр. генетика и биотехнология: материалы Междунар. конф., Минск, 6–8 апр. 1998 г. / Отд-ние биол. наук НАН Беларуси, Белорус. о-во генетиков и селекционеров, НИГиЦ НАН Беларуси. – Минск, 1998. – С. 292–293.Яковлева, Г. А. Полевые и лабораторные испытания трансгенного картофеля с частично-модифицированным геном бациллярного токсина / Г. А. Яковлева, И. В. Гулина, И. А. Родькина // Молекуляр. генетика и биотехнология: материалы Междунар. конф., Минск, 6–8 апр. 1998 г. / Отд-ние биол. наук НАН Беларуси, Белорус. о-во генетиков и селекционеров, НИГиЦ НАН Беларуси. – Минск, 1998. – С. 292–293.Родькина, И. А. Экспрессия устойчивости к Y-вирусу у трансгенного картофеля с геном белка оболочки YВК и первичный скрининг полового потомства: дис. … канд. биол. наук: 03.00.15 / И. А. Родькина. – аг. Самохваловичи, 2005. – 182 с.Родькина, И. А. Экспрессия устойчивости к Y-вирусу у трансгенного картофеля с геном белка оболочки YВК и первичный скрининг полового потомства: дис. … канд. биол. наук: 03.00.15 / И. А. Родькина. – аг. Самохваловичи, 2005. – 182 с.Родькина, И. А. Горизонтальный перенос чужеродных генов при испытании трансгенных образцов с геном белка оболочки Y-вируса картофеля в полевых условиях / И. А. Родькина, Н. С. Улитина, Г. А. Яковлева / Картофелеводство: сб. науч. тр.: в. 2 ч. / Науч.-практ. центр НАН Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству; редкол.: С. А. Турко [и др.]. – Минск, 2013. – Т. 21. – Ч. 1. – С. 193–210.Родькина, И. А. Горизонтальный перенос чужеродных генов при испытании трансгенных образцов с геном белка оболочки Y-вируса картофеля в полевых условиях / И. А. Родькина, Н. С. Улитина, Г. А. Яковлева / Картофелеводство: сб. науч. тр.: в. 2 ч. / Науч.-практ. центр НАН Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству; редкол.: С. А. Турко [и др.]. – Минск, 2013. – Т. 21. – Ч. 1. – С. 193–210.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.