РАЗРАБОТКА ИММУНОФЕРМЕНТНЫХ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧЕРНОЙ НОЖКИ КАРТОФЕЛЯ (PECTOBACTERIUM ATROSEPTICUM)
Аннотация
Получены специфические антисыворотки к четырем штаммам возбудителя черной ножки картофеля, относящихся к виду Pectobacterium atrosepticum – Pa393, Pa18077, Pa204-3 и Pa201-4. Показаны высокая иммунологическая активность и специфичность к Pectobacterium atrosepticum для антисывороток, полученных на основе штаммов Pa393 и Pa18077. На основе этих антисывороток приготовлены специфические части иммуноферментных диагностических тест-систем, позволяющие определять целевые бактерии с чувствительностью порядка 2·104–105 кл/мл и не реагирующие с близкородственными бактериями родов Pectobacterium и Dickeya, а также с другими фитопатогенными бактериями. Показан высокий уровень совпадения результатов при сравнительном испытании разработанных иммуноферментных диагностических тест-систем как с результатами полимеразной цепной реакции на основе праймеров Еca 1f/2r, так и коммерческим аналогом фирмы Loewe Biochemica (Германия).
Об авторах
Ю. А. Варицев
ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства имени А.Г. Лорха»
Россия
Россия
пос. Красково, Люберецкий район, Московская область
И. В. Сафенкова
Институт биохимии имени А.Н. Баха, ФИЦ «Фундаментальные основы биотехнологии» РАН
Россия
Россия
И. А. Зайцев
ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства имени А.Г. Лорха»
Россия
Россия
пос. Красково, Люберецкий район, Московская область
Г. П. Варицева
ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства имени А.Г. Лорха»
Россия
Россия
пос. Красково, Люберецкий район, Московская область
Список литературы
1. Методические указания по диагностике возбудителей черной ножки (Erwinia carotovora (Jones) Bergey et al.) и кольцевой гнили картофеля (Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus (Spieck. Et Kotth.) Skaptasson et Burk.) методами иммуноферментного анализа, иммунофлуоресцентной микроскопии и полимеразной цепной реакции / Ю.А. Варицев [и др.]. – М.: ВНИИ картофельного хозяйства, 2003. – 33 с.
2. Киру, С.Д. Источники устойчивости к Erwinia carotovora (Van Hall) среди образцов культурных и диких видов картофеля из коллекции ВИР / С.Д. Киру, А.М. Лазарев // Фитосанитарное оздоровление экосистем: материалы второго Всероссийского съезда по защите растений, С.-Петербург, 5– 10 декабря 2005 г. / ВИЗР. – СПб., 2005. – Т. 1. – С. 466–468.
3. Лазарев, А.М. Биологические особенности возбудителя черной ножки картофеля в Северо-Западной зоне РСФСР и методы его диагностики: автореф. дис. … канд. биол. наук / А.М. Лазарев. – Л., 1985. – 18 с.
4. Третьякова, О.М. Пектолитическая и мацерирующая активность штаммов Pectobacterium carotovorum, Pectobacterium atrosepticum и Dickeya dadantii на тканях клубней картофеля / О.М. Третьякова, А.Н. Евтушенко // Картофелеводство. – Минск, 2010. – Т. 18. – С. 186–190.
5. Allan, E. Immunofluorescent stain procedures for detection and identification of Erwinia carotovora var. atroseptica / E. Allan, A. Kelman // Phytopathology. – 1977. – Vol. 67. – P. 1305–1312.
6. Barras, F. Extracellular enzymes and pathogenesis of soft rot Erwinia / F. Barras, F. Van Gijsegem, A.K. Chatterjee // Annual Review of Phytopathology. – 1994. – Vol. 32. – P. 201–34.
7. Charkowsky,A. The soft rot Erwinia /A. Charkowsky // In. Plant-Associated Bacteria. – 2006. – P. 423–505.
8. De Boer, S.H. PCR detection of Erwinia carotovora subsp. atroseptica associated with potato tissue / S.H. De Boer, L.J. Ward // Phytopathology. – 1995. – Vol. 85. – P. 854–858.
9. Dye, D.W. A taxonomic study of the genus Erwinia. II. The «carotovora» group / D.W. Dye // New Zealand Journal of Science. – 1969. – Vol. 12. – P. 81–97.
10. Phylogenetic position of phytopathogens within the Enterobacteriaceae / L. Hauben [et. al.] // Systematic and Applied Microbiology. – 1998. – Vol. 21. – P. 384–397.
11. Hugh, R. The taxonomic significance of fermentative versus oxidative metabolism of carbohydrates by various Gram-negative bacteria / R. Hugh, E. Leifson // Journal of Bacteriology. – 1953. – Vol. 66. – P. 24–26.
12. Perombelon, M.C.M. Potato blackleg: Epidemiology, host-pathogen interaction and control / M.C.M. Perombelon // Netherlands Journal of Plant Pathology. – 1992. – Vol. 98. – P. 135–46.
13. Van Vuurde, J.W.L. Comparison of immunofluorescence colony-staining in media, selective isolation on pectate medium, ELISA and immunofluorescence cell staining for detection of Erwinia carotovora subsp. atroseptica and E. chrysanthemi in cattle manure slurry / J.W.L. Van Vuurde, N.J.M. Roozen // Netherlands Journal of Plant Pathology. – 1990. – Vol. 96. – P. 75–89.
14. Genus Erwinia: numerical analysis of phenotypic features / L. Verdonck [et al.] // Int. J. Syst. Bacteriol. – 1987. – Vol. 37. – P. 4–18.
15. Waldee, E.L. Comparative studies of some peritrichous phytopathogenic bacteria / E.L.Waldee // Iowa State J. Sci. – 1945. – Vol. 19. – P. 435–484.
Рецензия
Для цитирования:
Варицев Ю.А., Сафенкова И.В., Зайцев И.А., Варицева Г.П. РАЗРАБОТКА ИММУНОФЕРМЕНТНЫХ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧЕРНОЙ НОЖКИ КАРТОФЕЛЯ (PECTOBACTERIUM ATROSEPTICUM). Картофелеводство. 2016;24(1):139-148.
For citation:
Varitsev Yu.A., Safenkova I.V., Zaytsev I.A., Varitseva G.P. DEVELOPMENT OFIMMUNOFERMENTALDIAGNOSTIC TEST SYSTEMS FOR IDENTIFICATION OFPOTATOES BLACK LEG AGENT (PECTOBACTERIUM ATROSEPTICUM). Potato Growing. 2016;24(1):139-148. (In Russ.)
Просмотров: 153
Послать статью по эл. почте 