DETERMINATION OF THE EFFECTIVE CONCENTRATION OF CANAMICINE IN SELECTIVE MEDIUM FOR THE SELECTION OF TRANSGENIC POTATOES WITH THE NPT II REPORTER GENE
Abstract
The research result on the evaluation of a hybrid material of 4 combinations of analyzing crosses of transgenic potatoes with npt II gene on the phenotypic appearance of a marker sign – the resistance to the antibiotic kanamycin when cultured on selective medium are presented in the article. According to the DNA marking data, transgenic (+npt II) and non-transgenic forms (–npt II) were selected and cultured on selective media with different concentration of kanamycin sulfate (100, 220, 250, 300, 350, 400 mg/l). It was established that selective medium with a concentration of kanamycin sulfate of 220–250 mg/l should be used for the screening of generative progeny from transgenic samples with npt II gene. It was proved that the formation of air roots of in vitro potatoes plants is not associated with the expression of the marker gene npt II.
About the Authors
I. A. RodkinaBelarus
Yu. V. Yahont
Belarus
A. V. Kondratyuk
Belarus
G. A. Yakovleva
Belarus
References
1. Yoder, J. I. Transformation system for generation marker-free transgenic plants / J. I. Yoder, A. P. Goldsbrough // Biotechnology. – 1994. – Vol. 12. – P. 263–267.
2. Miki, B. Selectable marker genes in transgenic plants: applications, alternatives and biosafety / B. Miki, S. McHugh // Journal of Biotechnology. – 2004. – Vol. 107 (3). – P. 193–232.
3. Antibiotic Resistance Markers in Genetically Modified (GM) Crops // Biotechnology EFo. – 2001. – Р. 1–4.
4. Наследование и экспрессия трансгена npt II in vivo и in vitro у кукурузы / Е. В. Шапар [и др.] // Современная физиология растений: от молекул до экосистем: материалы Междунар. конф., Сыктывкар, 18–24 июня 2007 г.: в 3-х ч. – Сыктывкар, 2007. – Ч. 3. – 412 с.
5. Методические указания по первичному отбору гибридных сеянцев от трансгенных растений картофеля по маркерному признаку / И. А. Родькина [и др.]; Нац. акад. наук Беларуси, Науч.-практ. центр Нац. акад. наук Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству. – Минск: ГИВЦ Минсельхозпрода, 2009. – 20 с.
6. Методические указания по получению трансформированных растений картофеля / Рос. акад. с.-х. наук, ВНИИКХ. – М., 1995. – 15 с.
7. Исаенко, Е. В. Анализ наследования трансгена сry3aM у потомства модифицированных растений картофеля / Е. В. Исаенко, Н. А. Картель // Генетика и биотехнология XXI века. Фундаментальные и прикладные аспекты: материалы Междунар. науч. конф., Минск, 3–6 дек. 2008 г. / Ин-т генетики и цитологии НАН Беларуси. – Минск, 2008. – C. 82–85.
8. Богомаз, Д. И. Изучение взаимодействия генотипов растений и штамма Agrobacterium tumifacients при получении форм картофеля, устойчивых к колорадскому жуку / Д. И. Богомаз // Экологическая генетика. – 2005. – Т. III. – № 1. – С. 34–41.
9. Левенко, Б. А. Трансгенные растения. Современное состояние, проблемы, перспективы / Б. А. Левенко. – Киев: Дошкольник, 2000. – 305 с.
10. Инактивирование чужеродных генов в геноме трансгенных растений / Е. В. Дейнеко [и др.] // Изучение генома и генетическая трансформация растений: материалы Всерос. симпозиума, Иркутск, 23–27 авг. 1999 г. – Новосибирск: Наука, 2001. – С. 132–142.
11. Курочкина, С. Д. Получение трансгенных растений картофеля и их молекулярно-генетический анализ: автореф. дис… канд. биол. наук: 03.00.15 / С. Д. Курочкина; ИГиЦ НАН Беларуси. – Минск, 1995. – 20 с.
12. Получение новых форм картофеля методами биотехнологии / Г. А. Яковлева [и др.] // Аграр. наука на рубеже XXI в.: материалы общ. собр. ААН Респ. Беларусь, Минск, 16 нояб. 2000 г. / Минсельхозпрод, ААН Респ. Беларусь. – Минск, 2000. – С. 214–218.
13. Родькина, И. А. Наследование маркерного признака устойчивости к канамицину в половом потомстве трансгенных растений / И. А. Родькина, Г. А. Яковлева // Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии: материалы II Междунар. науч. конф., Москва, 18–19 окт. 2000 г. / РАСХН, ВНИИ с.-х. биотехнологии. – М., 2000. – С. 126–128.
14. Родькина, И. А. Устойчивость к канамицину полового потомства трансгенных растений картофеля с разными целевыми генами / И. А. Родькина, Г. А. Яковлева // С.-х. биотехнология: материалы II Междунар. науч.-практ. конф., Горки, 3–6 дек. 2001 г. / Минсельхозпрод, НАН Беларуси, БГСХА. – Горки, 2002. – С. 274–277.
15. Яковлева, Г. А. Полевые и лабораторные испытания трансгенного картофеля с частично-модифицированным геном бациллярного токсина / Г. А. Яковлева, И. В. Гулина, И. А. Родькина // Молекуляр. генетика и биотехнология: материалы Междунар. конф., Минск, 6–8 апр. 1998 г. / Отд-ние биол. наук НАН Беларуси, Белорус. о-во генетиков и селекционеров, НИГиЦ НАН Беларуси. – Минск, 1998. – С. 292–293.
16. Родькина, И. А. Экспрессия устойчивости к Y-вирусу у трансгенного картофеля с геном белка оболочки YВК и первичный скрининг полового потомства: дис. … канд. биол. наук: 03.00.15 / И. А. Родькина. – аг. Самохваловичи, 2005. – 182 с.
17. Родькина, И. А. Горизонтальный перенос чужеродных генов при испытании трансгенных образцов с геном белка оболочки Y-вируса картофеля в полевых условиях / И. А. Родькина, Н. С. Улитина, Г. А. Яковлева / Картофелеводство: сб. науч. тр.: в. 2 ч. / Науч.-практ. центр НАН Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству; редкол.: С. А. Турко [и др.]. – Минск, 2013. – Т. 21. – Ч. 1. – С. 193–210.
Review
For citations:
Rodkina I.A., Yahont Yu.V., Kondratyuk A.V., Yakovleva G.A. DETERMINATION OF THE EFFECTIVE CONCENTRATION OF CANAMICINE IN SELECTIVE MEDIUM FOR THE SELECTION OF TRANSGENIC POTATOES WITH THE NPT II REPORTER GENE. Potato Growing. 2017;25(1):68-81. (In Russ.)